細胞繼代培養 | 食品添加物合法業者資訊網

Trypsin為胰蛋白酵素，其作用為分解細胞與瓶壁之附著蛋白，EDTA為chelatingagent，其作用為去除Ca2+、Mg2+等離子，trypsin與EDTA二者共同作用，可使附著之細胞自瓶壁脫落 ...

1. 前言：

1.1 細胞生長至高密度時，即須收集細胞，分殖至新的培養瓶中，其稀釋比例依細胞種類而異。

1.2 收集細胞方法可用trypsin-EDTA、cell scraper、離心處理等，處理方法依細胞種類而異。

1.3 Trypsin-EDTA為收集吸附型細胞常用之方法。Trypsin為胰蛋白酵素，其作用為分解細胞與瓶壁之附著蛋白， EDTA為chelating agent，其作用為去除Ca2+、Mg2+等離子，trypsin與EDTA二者共同作用，可使附著之細胞自瓶壁脫落。 除了trypsin-EDTA，亦可使用cell scraper(細胞刮勺)刮落細胞。

1.4 Trypsin-EDTA作用時間勿太久，否則可能對細胞造成傷害或死亡。敲拍培養瓶不可太過猛烈， 避免對細胞造成傷害或造成培養瓶裂痕而污染。

2. 材料：

2.1 Dulbeccos phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free

2.2 trypsin-EDTA solution (0.05% trypsin-0.53mM EDTA.4Na)：若為大體積包裝，建議將其以 少量分裝於無菌試管中，保存於-2...