液相層析 | 食品添加物合法業者資訊網

2015年6月4日—以層析系統的動相分類，主要有氣相層析與液相層析等等1，而液相層析法適用於...液相層析(HPLC,High-performanceliquidchromatography)的原理3。

液相層析(Liquid Chromatography)國立臺灣師範大學化學系碩士班二年級 翁于婷

層析法是常見且普遍，可將複雜的混合物分離純化的方法。以層析系統的動相分類，主要有氣相層析與液相層析等等1，而液相層析法適用於純化大部分的化合物。

液相層析利用動相 (mobile phase) 和靜相 (stationary phase) 的交互作用，當混合物進入系統內時，不同成分的特性將決定物質在層析管柱內流動的快慢，再利用各成分移動速率之不同來分離2。液相層析儀最主要就是「動相式液體」，所以在液相層析法裡又有：液固層析法 (LSC) 和液液層析法 (LLC)。

液固層析法 (LSC) 或名為吸附層析法，是靜相為細粒固體之表面，溶質與沖提劑競爭固體表面的吸附面積，最適合拿來分離低極性的有機物，也就是最常被使用的高效率液相層析 (HPLC, High-performance liquid chromatography) 的原理3。在這兩相中，通常極性較大的液體會固定吸附在靜相的惰性載體上，而極性較小的液體溶劑則會被當作移動相、極性小的物質先流出，此時稱為「正相層析」(normal phase adsorption)。反之靜相吸附的液體極性小甚至是非極性液體，而移動相為極性液體、極性大的物質先流出，則稱為「逆向層析」(reverse phase adsorption)。

動相的選擇對液固層析法極為重要，此沖提法最常使用梯度沖提法，先利用沖提強度較低的溶劑將容易沖提的物質分離，然後逐漸增加沖提強度高的溶劑量，以致於可將吸附較緊密的物質從管柱中除去。此層析法最適合分子量小於 2000 的非極性化合物，並能溶解在低極性溶劑中，區別異構混合物4。

液液層析法 (LLC) 或名分配層析法，將和移動相不互溶的另一種液體附著於非活性固態顆粒的表面上，形成一層薄膜，因樣品中每個不同的成分對兩種液相有不同的分配率 (partition ratio)，來達到分離的效果。固態顆粒最常使用到的就是矽酸或矽凝膠，此兩種物質極性都很大，因此，為了讓靜相和固態顆粒緊密吸附，通常也會使用極性溶液，例如：水、乙二醇 (ethylene glycol) 或者是氧化丙腈 (3, 3’-oxydipropionitril...