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2019年5月8日—Trypsin-EDTA濃度常使用0.05%，視情況可以調整濃度，而時間常為1-10分鐘，視細胞種類而定。新接觸的目標細胞建議每1-2分鐘拿出來，於顯微鏡下觀察，成功 ...

Cell culture | 細胞培養

每個實驗室都會進行細胞培養，看起來細胞培養非常簡單，但是實際上卻有許多注意事項。以前研究所時，老師曾經告訴我們，要把細胞當作「男/女朋友」，要了解他/她的需求、要每天噓寒問暖和細心呵護。也許聽起來很誇張，但是對於新進實驗室的菜鳥們，細胞培養的確是一大難題。

了解細胞

開始進行實驗前，必須先了解細胞的種類和培養條件，才能夠先對目標細胞有基本的認識，以及準備細胞需要的環境。

開始實驗前，必須先要了解細胞的身分，包含來源 (人類或老鼠)、組織來源 (肝臟或肺臟)、細胞型態 (圓球、紡錘或完全貼平) 等等。尤其是細胞的型態，用來確認細胞培養時，細胞是否生長良好。

確認好細胞的身分和培養液後，接下來要選擇細胞住的房子——細胞培養皿。實驗室看到的細胞培養皿並不是簡單的無菌塑膠而已，貼附的過程為，細胞首先分泌細胞外基質，這些蛋白質黏附在培養皿的表面，然後細胞才透過細胞膜和細胞外基質的作用黏附到培養皿底部。因此，除了細胞本身的特性之外，也和培養皿表面結構有關。以前最早的細胞培養皿材質為玻璃，但是因為不容易清潔乾淨，以及細胞貼附效果不好，通常需要表面塗層處理，因此後來改用拋棄式的塑膠。使用的塑膠材質為 polystyrene，為有苯環的長碳鏈，優點在於其光學透明性、容易塑模以及可以使用輻射殺菌。缺點卻是它非常疏水，因此會經過尖端放電或是氣體電漿處理，產生的高能量氧原子作用在 polystyrene 上，產生大量的羥基和羰基，而增加親水性。後來更加上合成的 polymer poly-lysine，提高生物相容性，增加細胞貼附和生長。市面上的細胞培養皿沒有太大差別，都可以購買使用，只不過有不同大小的培養皿，依實驗需求購買，切記不要把10 cm dish 和 petri dish 、96 well plate 和 ELISA plate 搞混。有些實驗者會自己再黏附上 collagen Type I, fibronect...