【图】葡萄糖氧化酶法测血糖 | 食品添加物合法業者資訊網
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖,使葡萄糖分子中的醛基被氧化,生成葡萄糖酸及过氧化氢。过氧化氢被耦联的过氧化酶催化放出氧,后者将色原性氧受体4-氨基安替比林耦联酚氧化,并与4-氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。此反应称Trinder反应。参考区间:健康成年人,空腹血清葡萄糖3. 9~6. 1mmol/L(700~110mg/dl)。
缓冲液(0. 1mol/L)pH 7. 0,取无水磷酸二氢钠8. 5g及无水磷酸二氢钾5. 3g,溶于800ml蒸馏水中,用1mmol/L氢氧化钠或盐酸调pH至7. 0,然后用蒸馏水稀释至1L。 酶试剂:取葡萄糖氧化酶1200单位,过氧化酶1200单位,4-氨基安替比林10mg、叠氮钠100mg加上述磷酸缓冲液至80ml左右,调pH至7. 0,再加上磷酸缓冲液至100ml,置冰箱保存,至少可稳定3个月。 酚试剂:酚100mg溶于100ml蒸馏水中(酚在空气中易氧化成红色,可先配成50g/dl的溶液,储存于棕色瓶中,用时稀释)。 酶酚混合试剂:酶试剂及酚试剂等量混合,在冰箱内可存放1个月。 葡萄糖标准贮存液(100mmol/L):称取标准纯度的无水葡萄糖(MW 180. 16,预先置于80℃烤箱内干燥恒重后,移置于干燥器内保存)1. 802g,以12mmol/L苯甲酸溶液溶解并转移到100ml容量瓶内,再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至100ml刻度处,至少放置2小时后方可应用。 葡萄糖标准应用液(5mmol/L):吸取葡萄糖标准贮存液5ml,置于100ml容量瓶中,用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度,混匀。 抗凝防腐剂:草酸钾6g,氟化钠4g溶解于100ml。0. 1ml可抗凝2ml血液。取数支16mm×100mm的试管,按表8-3进行操作。
葡萄糖氧化酶法操作步骤
混匀,置37℃水浴中,保温15分钟,分光光度计波长505nm,比色杯光径1. 0cm,以空白管调零,分别读取标准管和...
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