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His-tag可與多種金屬離子發生特殊的相互作用，如Ca2+、Mg2+、Ni2+、Cu2+，Fe3+等，其原理是利用蛋白質表面的特性，使之被吸附在凝膠柱上，從而達到分離純化蛋白的目的。組 ...
Recombinant Protein | His-tag 重組蛋白純化系統
His-tag 中文稱之為組氨酸標籤，His 可被鎳柱吸附，用於純化重組蛋白，無論表達的蛋白是可溶的或者包涵體都可以用固定金屬離子親和層析（IMAC）純化，是由連續六個以上的組氨酸所組合而成的一段胺基酸序列。His-tag是蛋白質重組技術中經常用到的一種標籤，其序列為6個組氨酸HHHHHH，其特點是分子量小，只有不到0.84 KD，基本不改變蛋白質的生物結構，不改變蛋白質的溶解性，更重要的是它使蛋白質的純化變得極為方便。根據組氨酸上的咪唑環可以與二價金屬離子結合的原理，His-tag 可結合在目的蛋白的 C末端或 N末端，形成特殊的結構，以便於進行下一步的純化及檢測。可以利用金屬離子親和層析技術純化帶有 His標籤的蛋白，即將含有目的蛋白的裂解液通過固定的二價金屬離子（通常是二價 Ni 離子）填料，帶有 6*His-tag的蛋白質即與填料結合，其它蛋白不與填料結合，最後再用高濃度的咪唑即可將目的蛋白洗脫下來。
一、His-tag 融合蛋白的優勢
His-tag 為分離純化蛋白質等生物工程產品最有效的技術之一。His-tag 單株抗體可以用來鑑定His-tag的蛋白質的表達情況（如目的蛋白的相對表達量、分子量）、在細胞中的定位以及其它特性。His-tag 作為蛋白純化時的首選標籤，其優勢在於：
C末端或 N末端的 His-tag與細菌的轉錄翻譯機制兼容，有利於蛋白表達。 採用 IMAC（固定化金屬離子親合層析）純化His-tag融合蛋白操作更加簡便。 His-tag 對目標蛋白本身特性幾乎沒有影響，不改變目標蛋白本身的可溶性和生物學功能。 His-tag 非常小，一般不影響蛋白質的功能，且在融合蛋白結晶後對蛋白的結構沒有影響。 His-tag 的免疫原性相對較低，可將純化的蛋白直接注射入動物體內進行免疫並製備抗體。 His-tag 融合蛋白的純化適用範圍廣，可以在非離子型表面活性劑存在的條件下純化，也可以在變性條件下進行純化。前者通常用來純化疏水性強的...Recombinant Protein | 食品添加物合法業者資訊網
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