米氏常数 | 食品添加物合法業者資訊網

（2）已知某个酶的Km，可计算出在某一底物浓度时，某反应速度相当于Vmax的百分率。（3）在测定酶活性时，如果要使得测得的初速度基本上接近Vmax值，而过量的底物 ...

在20世纪初期，就已经发现了酶被其底物所饱和的现象，而这种现象在非酶促反应中，则是不存在的，后来发现底物浓度的改变，对酶反应速度的影响较为复杂，1913年前后Michaelis和Menten作了大量的定量研究，积累了足够的实验证据，从酶被底物饱和的现象出发，按照中间产物设想，提出了酶促反应动力学的基本原理，并归纳为一个数学表达式，称之为米氏方程式：

[E]+[S]↔[ES]↔P+[E]

v=Vm[s]/(Km+[s])=Vm/(1+Km/[s])

式中，[E]为游离酶浓度；[S]为底物浓度；[ES]为酶与底物结合的中间络合物浓度；v为酶促反应速度；Vm为酶促反应最大速度；Km为米氏常数，是酶促反应达最大速度（Vm）一半时的底物(S)的浓度

Km的含义是酶促反应达最大速度（Vm）一半时的底物(S)的浓度。，即当V=Vm/2时，【S】=Km,单位为mol/l。Km是酶极为重要的动力学参数，其物理含义是指ES复合物的消失速度常数（k-1+k2）与形成速度常数（k1）之比。

Km即是当反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。从v—[s]矩形双曲线上可得V，再从V/2处可求得Km值，但实际上，即使用很大的底物浓度，也只能得到趋近于V的反应速度，而达不到真正的V，因此测不到准确的Km值，为了得到准确的Km值，可以把米氏方程式加以改变，使之成为斜截式：y=kx+b的直线方程，然后用图解法求出Km值 [1]。

实验时选择不同的[S]测定相应的v，求出两者的倒数，以1/v对1/[S]绘出工作曲线如下图，然后利用斜率，换算出Km。

实际上，由于操作条件和操作技能所限，以及操作时准确度达不倒要求，引入误差太大等原因，常常得不到这样的一条理想的直线，那么它的斜率就不是一个定值，因而Km的值就不能直接由这...